木瓜蛋白酶用什么方法提取?

作者:admin 来源:未知 点击数: 发布时间:2019年07月29日

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  木瓜卵白酶是从番木瓜乳汁为原料,用于提取木瓜浆的番木瓜次要集中在广西、广东、海南等种植区域,木瓜浆颠末现代工艺提纯而得木瓜卵白酶到。木瓜卵白酶在食物加工、饲料加工、化妆品等式业的使用日趋普遍,对其纯度要求也越来越高。东恒华道地处于木瓜集中种植区,有地区及成本劣势,有多年木瓜卵白酶出产经验,本文简单引见木瓜卵白酶提纯方式。

  木瓜浆及木瓜浆收集是木瓜卵白酶提取的主要一环

  木瓜卵白酶提取过程中需要留意的事项

  1、食物及制革等对酶纯度要求不高的工业,适合于用单宁沉淀法工艺比力简单,原材料耗损少,所需设备简单,但酶的收受接管率比力低并且酶纯度不敷高。化妆品成分和部门的医疗卫出产品。合用于颠末盐析、结晶和重结晶后获得纯度较高的木瓜卵白酶。要想获得纯度更高的酶用于科学尝试和医疗卫生,要把上述方式与剃度洗脱法、无机溶剂沉淀法或超滤浓缩法连系起来。但这些方式都比力复杂,工人本质要求高,且设备一次性投资大。

  2、木瓜卵白酶是一种生物活性物质,易受重金属离子,如铁、铜等,或者化学药品等会惹起失活,所以在出产过程中要求低温、短时、卫生,忌碱、忌强酸感化。

  3、木瓜卵白酶在出产过程中制得得单宁沉淀物,可经60℃真空干燥、破坏后制得粗酶,合用于食物及制革等对酶纯度要求不高的工业;洗脱后酶得度高,合用于科学事业、作为化妆品成分或是医疗卫生行业。

  3、木瓜卵白酶是一种水解酶,对人体的皮肤有刺激分化的感化,所以出产人员必需穿戴工作服、工作帽、口罩、手套和胶鞋等卫生防护用品,做好出产防护工作。

  5、木瓜卵白酶是一种胶体物质,出产过程中容易发生气泡而形成丧失。

  木瓜卵白酶提取流程

  浆液采集(番木瓜)→浆液(过滤)→滤液(单宁法去杂质干燥)→ 粗酶成品(加半胱氨酸夹杂研磨)→研磨夹杂液(调PH后过滤)→滤液(硫酸铵和氯化钠两次盐析) →盐析物(低温半胱氨酸溶液中结晶)→结晶体(重结晶)→精酶

  木瓜浆收集桶

  木瓜浆收集桶

  木瓜卵白酶提取的操作方式

  1、浆液的采集:番木瓜果实的浆液中富含木瓜卵白酶,可是在果实完全成熟时,白色浆液就会逐步削减。因而,采集浆液时应选择绿色的未成熟果。其采浆方式是:用薄不锈钢刀片沿番木瓜果实的纵线mm,按照果实大小,每个果实能够割5-10条刀口。然后用毛笔蘸取浆液抗凝庇护剂涂刷在每一条刀口上,防止因为浆液凝固而影响浆液的采集。最初,在果实外面套上一个比果实稍大的塑料袋,并将其固定在果柄处,用于收集流出的浆液。番木瓜起头采浆液后,就能够每隔5-8天,在没有刀口的部位破皮采集浆液,直到番木瓜果皮起头变黄为止。

  2、浆液的加工:采集的番木瓜浆液要及时加工,一般不要跨越24小时。在加工时,起首在浆液中插手适量的庇护剂,庇护木瓜卵白酶中的活性巯基,常用的庇护剂有乙二胺四乙酸(EDTA)、亚硫酸氢钠(NaHSO3)、焦亚硫酸钠(Na2S2O5)等。然后将浆液进行过滤,除去杂质。再将浆液装入珐琅浅盘中,浆液的深度在8-12mm为好。最初,将珐琅浅盘装入鼓风式热风干燥箱中,在55-60℃的前提下对浆液进行热风干燥(若是前提答应,最好是采用低温真空干燥法或喷雾干燥法进行干燥)。当浆液的含水量下降至5-8%时,即可从珐琅浅盘中取出片状的木瓜卵白酶,再颠末破坏,即可获得木瓜卵白酶粗品。

  3、木瓜卵白酶的精制:起首将破坏好的木瓜卵白酶粗品与0.04M的半胱氨酸溶液夹杂后进行研磨,然后将夹杂液的pH值调理到9.0,过滤除去不溶物。再别离用硫酸铵[(NH4)2SO4]和氯化钠(NaCl)进行两次盐析。最初在2-4℃的低温前提下,让木瓜卵白酶在pH值为6.5的0.02M半胱氨酸溶液中结晶,再将发生的结晶体溶于蒸馏水中进行重结晶,即可获得颠末精制的木瓜卵白酶。

  东恒华道地处于木瓜集中种植区,有地区及成本劣势,有多年木瓜卵白酶出产经验

  木瓜卵白酶与木瓜粉样品

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